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楼主: 春三农场

蓝莓组培的坎坷之路

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发表于 2014-7-18 15:09 | 显示全部楼层 来自: 中国浙江金华
春三农场 发表于 2014-7-17 17:37
如果仅仅改变一下氯化钙和硫酸钾,肯定不能用的。你的培养基是不是买现成的?

你肯定是其他问题导致培养不成功
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发表于 2014-7-18 15:34 | 显示全部楼层 来自: 中国黑龙江大兴安岭地区
不好意思啊,浇点冷水。我看了你的图片,你是在用组培的技术做扦插。组培是使用很小的一点组织材料做出成百上千的苗。即用很小的一点组织材料先做出很多的芽来,然后,把芽分开,用无菌水把芽上的培养基冲洗干净,再把芽放到从新做的培养基上,让其生根,形成一个个小的植株
做实事,说大白话,脚踏实地,事实为依据 . 细节决定成败.我说的仅供参考,出了问题,是你没做好
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 楼主| 发表于 2014-7-18 19:46 | 显示全部楼层 来自: 中国福建泉州
zqlin1022 发表于 2014-7-18 15:08
我自己配的,你肯定是其他问题
这个培养基我用几年了,而且培育高丛、兔眼都没什么问题

你氮源用的是什么?浓度多少?
硝酸钾和水合硝酸钙的浓度分别是多少?
美丽心情,把水果都弄到浙江来种种看。
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 楼主| 发表于 2014-7-18 19:47 | 显示全部楼层 来自: 中国福建泉州
兴安蓝莓 发表于 2014-7-18 15:34
不好意思啊,浇点冷水。我看了你的图片,你是在用组培的技术做扦插。组培是使用很小的一点组织材料 ...

刚开始的时候,我跟你的想法是一样的。
美丽心情,把水果都弄到浙江来种种看。
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发表于 2014-7-19 15:33 | 显示全部楼层 来自: 中国浙江金华
兴安蓝莓 发表于 2014-7-18 15:34
不好意思啊,浇点冷水。我看了你的图片,你是在用组培的技术做扦插。组培是使用很小的一点组织材料 ...

你那是狭义的理解
广义的组培,外植体可以是器官、组织、细胞,枝条即是器官
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发表于 2014-7-19 21:53 | 显示全部楼层 来自: 中国黑龙江大兴安岭地区
zqlin1022 发表于 2014-7-19 15:33
你那是狭义的理解
广义的组培,外植体可以是器官、组织、细胞,枝条即是器官

你说得对,我们搞组培就是为了大量的繁殖植物
做实事,说大白话,脚踏实地,事实为依据 . 细节决定成败.我说的仅供参考,出了问题,是你没做好
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发表于 2014-7-21 22:39 | 显示全部楼层 来自: 中国云南昭通
以改良的WPM为基本培养基。改良为:以水合硝酸钙[Ca(NO3)2·4H2O]684毫克/升、硝酸
钾(KNO3)190毫克/升、(C10H13FeN2NaO8)73.4毫克/升和盐酸硫胺素0.1毫克/升,代替原来WPM培养基中的硫酸钾(K2SO4)、氯化钙(CaCl2)、硫酸亚铁(FeSO4)和乙二胺四乙酸钠(NaEDTA)。
   
他说的应该就只是这个配方.但我觉得这个配方一有学术造假的嫌疑,二他本人就是信口开河.
老三,你验证3周不出苗.或者<70的出苗率,再或者成本过高的话,....................
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发表于 2014-7-21 22:52 | 显示全部楼层 来自: 中国云南昭通
出苗通知一声,这个的N供给还是可以的。只PH一定要调好,我 估计应该在5.7-6.2之间吧,调到5.2附近。加玉米素1.5mg/L-3mg/L之间。对应的弥补了1、2图的芽缺陷。说不定还可以。
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发表于 2014-7-21 22:53 | 显示全部楼层 来自: 中国云南昭通
鬼才 发表于 2014-7-16 16:18
不愧是理工男啊。

我本人是医生,应该不算工科男,爱好而已
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 楼主| 发表于 2014-7-22 06:08 | 显示全部楼层 来自: 中国福建泉州
ynyshu 发表于 2014-7-21 22:39
以改良的WPM为基本培养基。改良为:以水合硝酸钙[Ca(NO3)2·4H2O]684毫克/升、硝酸
钾(KNO3)190毫克/升、( ...

这个配方就是满大街的“论文”里提到的那个偏方,不可能成功的偏方,试验都不用去做的。细枝末节的改良提到了,核心问题还是隐藏了。最早提出这个配方的人是做成功的,但是基于商业保密,他隐匿了主要的改良点,公开了不重要的部分。接下来天下文章一大抄,那些写论文的人就全部参考了这个配方,做出了各种各样的试验。



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 楼主| 发表于 2014-7-22 06:10 | 显示全部楼层 来自: 中国福建泉州
ynyshu 发表于 2014-7-21 22:52
出苗通知一声,这个的N供给还是可以的。只PH一定要调好,我 估计应该在5.7-6.2之间吧,调到5.2附近。加玉米 ...

蓝莓没有硝态氮的代谢能力!!!
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 楼主| 发表于 2014-7-22 06:18 | 显示全部楼层 来自: 中国福建泉州
ynyshu 发表于 2014-7-21 22:39
以改良的WPM为基本培养基。改良为:以水合硝酸钙[Ca(NO3)2·4H2O]684毫克/升、硝酸
钾(KNO3)190毫克/升、( ...

目前我的方向是:
1:自己配药水,而不是购买市场上的成品,成品干药是把所有组分放一个瓶子里,钙离子和磷酸根离子容易沉淀。
2:寻找合适的氮源,蓝莓不具备硝态氮的代谢能力,增加铵态氮。具体增加多少有待试验决定
3:减少氯离子的含量,氯离子对蓝莓有“毒性”。
4:减少有机物的含量,蓝莓是茎段培养,不是细胞培养,茎段是个器官,有较强的代谢能力,对有机物依懒性不强,较少有机物含量可以减少菌类污染的可能性。
5:对于容易沉淀的离子,调整整体配方,将水溶性控制在最佳状态。
6:适当降低蔗糖的浓度,因为蓝莓茎段出芽后是有很强代谢能力的。
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 楼主| 发表于 2014-7-22 06:25 | 显示全部楼层 来自: 中国福建泉州
大连大学的王贺新教授在蓝莓学术上是有响当当的名气的,大家看看他的一段描述:

组培技术自上世纪初发展至今已经广泛应用于工厂化育苗,技术相对比较成熟,但针对不同的植物品种,还需要对技术参数进行相应调整。因为诱导外植体在培养基中发育的因素有很多,植物本身的特性、培养基的营养组成和激素平衡以及外界的物理条件等等,等都会影响离体细胞的胚发生。由于国内的蓝莓育苗也刚刚起步,王贺新就把全世界能搜集到的蓝莓组培配方都搜集到了,但是试验以后却很不理想,不是死苗多就是叶片发黄、发育不良。
王贺新:“在国外有很多蓝莓的组培,但好多都是保密的,像日本申请了一个蓝莓的组培专利,公开的东西看到一些,但是实际操作达不到效果,因为有一部分是被遮蔽的,没有公开
所以做不出来。”
从植株上切下来的植物器官或组织片称为外植体,外植体能否发育成我们需要的苗,最关键的环节就在于培养基地调整。培养基由各种无机盐、有机营养物、生物活性物质、激素、琼脂和水等成分组成,它给外植体生长发育提供所必须的营养。王贺新:“这就是培养蓝莓用的培养基,这是我们经过三年时间,反复试验总结出来的,最早我们用ms培养基,用二分之一、四分之一,效果都不是很好,后来我们又开发出来n系列的培养基,有n1、 n3、 n4 ,后来发现效果也不是很好,后来在此基础之上,我们开发出现在的培养基,这也是一个系列的,根据品种不同做一些微调,大部分蓝莓在这个培养基中,都是比较适合的。”
培养基的技术关键点攻克以后,蓝莓苗在组培室里终于可以健康成活了。现在刨除操作或者是环境污染的因素外,蓝莓组培的成活率可以达到100%。蓝莓组培苗的诞生,大大加快了蓝莓苗木的扩繁速度。王贺新:“这个过程就是蓝莓育苗,从初代培养一直到成苗的全过程,初代培养是用,在室外或实验室取的茎段,进行组织培养,大约经过三个月的时间长到这么大,那么第二个过程大家可以看,有好多叶片,每个叶片有个芽,把每个芽取下来之后,就是第三个过程——继代培养,继代培养以后就可以,由这一株变成很多株,一般在10株以上,继代培养再经过三个月的时间,就变成这个程度,这个苗一个可以作为生产来利用,也可以继续用这部分的芽进行继代培养,继代培养在一年当中大约能转三次,一年时间大约能繁育出6000-10000株苗,因此采用组培育苗繁殖速度是非常快的。”
蓝莓经过继代培养后大约三个月的时间,当每个瓶内达到15个茎以上时就可以从瓶里移到驯化床进行生根炼苗了,而大多数植物的组培繁苗都是瓶内生根、生完根再移栽炼苗。那么蓝莓组培为什么不能瓶内生根呢?王贺新:“从组培室出来的瓶苗,以往我们采用的是瓶内生根,但是在炼苗过程中,由于沾有培养基,根容易发霉,成活率很低,后来就采用瓶外生根,同时也研究出适合瓶外生根的基质,因为这个基质配方还没有经过成果鉴定,所以还暂时不予公开。”

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发表于 2014-7-22 16:04 | 显示全部楼层 来自: 中国云南
"组培苗无菌检测原理及技术"一书中关于不同氮素水平下组培苗的氮素利用率那个小节有一定参考价值。
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发表于 2014-7-24 08:48 | 显示全部楼层 来自: 中国吉林吉林市
你这个不是玩组培,是硬枝扦插
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发表于 2014-7-25 10:08 | 显示全部楼层 来自: 中国北京
蓝莓人士 发表于 2014-7-24 08:48
你这个不是玩组培,是硬枝扦插

这是组培的初代培养吧!
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发表于 2014-7-25 11:29 | 显示全部楼层 来自: 中国吉林吉林市
秦秦 发表于 2014-7-25 10:08
这是组培的初代培养吧!

组培是取牙尖,而不是木质化的枝条,这个叫硬枝扦插,可以看看我的绿植扦插,261940896
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发表于 2014-7-31 08:57 | 显示全部楼层 来自: 中国浙江杭州
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zqlin1022 发表于 2014-7-19 15:33
你那是狭义的理解
广义的组培,外植体可以是器官、组织、细胞,枝条即是器官

对~~~~~
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发表于 2014-10-29 21:15 | 显示全部楼层 来自: 中国山西太原
中科院发来贺电!!!!!!!!!!
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