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蓝莓组培苗瓶外生根技术的研究
孙阳
摘要:以苗岭50天‘Sierra’ 、‘Bluecrop’、 ‘Toro’ 和‘Reveilla’4个蓝莓品种继代芽苗为试材,研究在不同基质不同的激素处理对继代芽苗瓶外扦插生根的影响,探索蓝莓芽苗瓶外扦插生根的技术方法。试验结果表明:(1)不同基质对扦插苗瓶外生根率影响较大,且苔藓是其扦插生根的最优基质。(2)在三种处理下不同激素浓度下,萘乙酸与吲哚乙酸等比例混和处理在萘乙酸和吲哚乙酸浓度各1000mg/kg 时为最佳处理。(3)四种蓝莓品种间生根能力, Sierra和Toro生根能力较好,而Reveilla和Bluecrop较差。
Abstract:Using the proliferation buds aged for 50 days of Four blueberry varieties (Reveilla、Sierra 、Toro and Bluecrop)test materials ,to study the effection of different ground substance and exogenous hormones. ,and to search the method of rooting of the proliferation buds by inserting. Result indicated that: (1) Different ground substance has effection ,taixian is the best one for rooting. (2) In the different exogenous hormones, treating with the NAA+IBA mixed in same proportion in 1000 mg/kg ,can best increased the rooting rate.(3) The rooting ability of the four varieties are different , Sierra and Toro are better than Reveilla and Bluecrop.
蓝莓Blueberry又名蓝浆果,属杜鹃花科(Ericaceae)越桔属(Vacciniodeae)植物。蓝莓果实含有防止脑神经衰老、增强心脏功能,明目及抗癌等独特功效物质。因此被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一。据美国蓝莓专家预测,蓝莓将成为本世纪世界范围内最具有发展潜力的果树树种[1~4]。扦插作为无性繁殖中最重要的手段之一,因其简单易行、育苗周期短、繁殖系数高以及苗木健壮等优点,在植物苗木繁育得到广泛应用。而相对于扦插苗,蓝莓组培苗存在培养程序多、苗木成本高等问题。为此,在蓝莓组培快繁技术成熟的基础上,进行蓝莓继代芽苗瓶外生根技术研究,以减少组培苗培养环节,缩短育苗周期,降低苗木成本,进一步完善蓝莓组培快繁及工厂化育苗技术体系,促进组培苗的推广应用具有重要的现实意义。
1 材料与方法
1.1 材料
选用‘Sierra’ 、‘Bluecrop’、 ‘Toro’ 和‘Reveilla’4个蓝莓品种继代芽苗为试材,在改良WPM + ZT 0.5 mg•L-1+ IBA 0.1mg•L-1培养基上经多次继代增殖培养的继代丛生芽苗[5],在继代培养室(继代培养室以日光灯为光源,光强约为1500~2 000 lx)培养50 d,高6~8cm芽苗作为瓶外生根试验的“微型扦穗”,芽条基部扦入基质深度约为3~4 cm为宜。
1.2瓶外扦插前处理
瓶外生根前,将在继代培养室培养50d左右的继代芽苗(此时丛生芽分化基本完成)移到温室准备室,以自然散射光为光源,光照强度为3000~4000 lx,温度控制在15~25℃,培养7~8d后,打开瓶盖,在原炼苗室继续炼苗1~2 d(依季节不同而调整,以培养基不滋生菌为准),完成丛生继代芽苗的炼苗。扦插前取出放入清水中,将沾带的培养基清洗干净待用。扦插时,用剪刀将芽苗茎低端用剪刀剪断,选用生长旺盛、粗壮的继代芽苗,把剪口端3cm左右茎段快速浸蘸配制好的激素溶液,然后扦插到准备好的基质中。
1.3 栽培基质的筛选
选试验选用河沙、蛭石、苔藓等3种类型的土壤基质,3种基质均装入塑料穴盘(每个穴盘72个穴),用0.1%的高锰酸钾消毒基质,覆盖薄膜24 h后即可使用。以品种‘Sierra’为试材,选用激素IBA,各配制3种激素浓度分别为200 mg•L-1、500 mg•L-1、1000 mg•L-1、1500 mg•L-1,2000 mg•L-1,将继代芽苗茎端切口快速浸蘸激素处理。芽苗扦插35 d后统计各试验号芽苗生根率(生根苗数量/扦插总量×100%)。
1.4 生根激素的筛选
选用苔藓为栽培基质,以品种‘Sierra’为试材,以NAA、IBA和NAA与IBA二者等比例组合三种处理,三种处理中NAA与IBA的激素浓度为分别为200 mg•L-1、500 mg•L-1、1000 mg•L-1、1500 mg•L-1,2000 mg•L-1, 每个浓度扦插100株,芽苗扦插35d后统计各试验号芽苗生根率、生根数量(每株扦插苗生出根的数量)、根系总长(所有根系长度的总和)和平均根系长度(根系总长/生根总量),生根量包括生根数量和根系总长。
1.5品种间生根能力的比较
选用‘Sierra’ 、 ‘Bluecrop’、 ‘Toro’和‘Reveilla’四个蓝莓品种,以苔藓为栽培基质,萘乙酸与吲哚乙酸等比例混和处理,浓度为1000mg/kg,每个浓度扦插100株,芽苗扦插35d后统计各试验号芽苗生根率、生根数量和根系总长。
1.6扦插后培养条件控制
芽苗移栽后,加强大棚(瓶外生根环境)内水分、光照、温度、湿度、通风透气等培养条件的控制,营建适宜于芽苗生根诱导的培养条件是提高瓶外生根率的基本保障。大棚内最高温度控制在30℃以下,最低温不低于18℃,适当的温差有利于根的诱导,蓝莓组培苗不喜强光直射,需用透光率50%的遮阳网以覆盖薄膜上部,如遇阴雨天及时揭去遮阳网,以保持棚内的光照,可通过喷雾调控温室温度。大棚内套用小工棚(跨度在1.5~1.8米,以便操作管理),小拱棚内通过喷雾保持85%以上的空气湿度,且喷雾用水PH调整为5.0~5.5,小拱棚仍需用透光率50%的遮阳网以覆盖薄膜上部,在中午光照太强时搭上遮阳网,持续3周左右,至芽苗根萌发后,可逐渐揭去小拱棚上遮阳网。
2结果与分析
2.1 不同基质对芽苗瓶外生根的影响
选用河沙、蛭石、苔藓等3种类型的土壤基质,五个浓度梯度IBA上的继代丛生芽苗,每个试验号100株芽苗,扦插后严格控制好瓶外生根的光、温、湿、气等环境条件,培植35 d后,统计扦插苗在各基质中的生根率,结果如图1所示。从图1可知,在个基质中,随着IBA浓度的变化,扦插苗生根率都呈现先上升后降低的趋势,但可明显看出扦插苗在苔藓中生根效果高于其他两种基质,且生根率高达76%。可见,不同基质对扦插苗瓶外生根率影响较大,且苔藓是其扦插生根的最优基质。
2.2 不同激素处理对蓝莓芽苗瓶外生根的影响
表1 不同激素处理对蓝莓芽苗瓶外生根率、根系数量、根系总长、平均跟长的影响
激素种类 激素浓度
(mg/kg) 生根率(%) 根系数量
(根) 根系总长(cm) 平均跟长
(cm/根)
CK 0 2 3 0.06 0.02
NAA 200 23 32 10.24 0.32
500 41 87 113.97 1.31
1000 63 153 203.49 1.33
1500 58 129 154.8 1.2
2000 36 52 57.72 1.11
IBA 200 32 47 28.67 0.61
500 61 128 194.56 1.52
1000 72 155 301.1 1.94
1500 76 206 451.14 2.19
2000 63 97 180.11 1.43
NAA+IBA 200+200 51 109 129.71 1.19
500+500 76 183 459.33 2.51
1000+1000 85 256 696.32 2.72
1500+1500 71 164 347.68 2.12
2000+2000 60 114 191.52 1.68
不同激素不同处理浓度对蓝莓芽苗瓶外扦插生根生根结果见表1。由表1可知,激素处理对蓝莓芽苗瓶外扦插生根有明显的促进作用,由生根率可知,三种处理均比对照有明显的提高,且三种激素不同处理浓度对各生根指标的影响有明显的不同。随着浓度升高,三种处理下生根率与生根量都呈现先上升后下降的趋势,但吲哚丁酸在1500时达到高峰,而萘乙酸和萘乙酸与吲哚乙酸混和处理中,浓度在1000时达到高峰值,且在萘乙酸与吲哚乙酸混和处理中各指标值达到最高点,生根率高达85%,根系总长达到696.32厘米。总上可知,在三种处理下不同激素浓度下,萘乙酸与吲哚乙酸等比例混和处理在萘乙酸和吲哚乙酸浓度各1000时为最佳处理。
2.3不同品种间生根能力的比较
不同品种在相同培养基质相同激素处理下,生根结果如图2所示。由图2可知,五个蓝莓品种生根率都在70%以上,其中Duke的生根率最高,达到92%,Sierra的生根率最低72%,Blueberry和Toro也均达到80%以上。就根系总长,可以看出Duke和Blueberry的根系总长度分别为67.68dm和57.81dm,而Sierra为28.46dm,前两品种的根系总长超过Sierra的两倍。而根系数量相比较,Duke >Bluecrop>Toro>Reveilla>Sierra。可见,不同品种生根力之间存在明显的差异,尤其是根系总长表现差异性最为明显。Duke无论生根率、根系数量还是根系总长在五个品种都最高,而Sierra ,这三个指标都最低。总体而言,Duke ,Bluecrop和Toro生根能力较好,而Reveilla和Sierra较差。
3讨论与结论
组培苗瓶内生根较瓶外生根技术而言,是将继代芽苗瓶内生根培养阶段与生根苗移栽驯化结合起来,节约了生产成本,且大大缩短了生根时间。瓶内诱导试管苗生根过程的时间长、费用高、效率低。Debergh等[8]认为瓶外生根总费用可降低35%~75%。尤其就蓝莓而言,在瓶内生根时间在三个月以上,而瓶外生根仅需35天~45天。对蓝莓而言,组培苗瓶外生根是最具发展潜力的组培工厂化育苗技术环节。
瓶外生根的光、温、湿等环境条件较瓶内的微环境不易调控, 生根率较试管苗瓶内生根率有多降低,芽苗瓶外扦插也如同瓶内诱导生根培养需要一定的光、温、湿以及基质的PH,如能严格控制瓶外生根的环境条件,则瓶外生根更为有利[6]。
蓝莓根系对养分的需求量较低, 耐盐能力弱。盐分过高, 根系易受伤害, 甚至死亡, 低盐分的根际环境有利于生根及根系的生长。在生根前, 不需养分的供应。蓝莓的根系适宜疏松、有机质含量高的酸性基质,一般pH值4.0~5.2 为宜。水苔是有机基质, 具有保湿、透气、pH 值适宜、使用方便等优点,其自身具有活性因子, 利于诱发根系,并促进其生长。在水苔中生长的根系活性强, 可在短时间内形成根群[7]。
试验证明蓝莓品种、扦插基质、激素种类及浓度都直接影响着蓝莓继代芽苗的瓶外生根率和生根量。其中扦插基质和激素种类及浓度是影响芽苗瓶外生根率的关键因素,以苔藓为基质、以浓度萘乙酸1000mg•L-1+吲哚丁酸1000 mg•L-1是芽苗瓶外生根的最佳组合,而Duke ,Bluecrop在这种组合下,生根效果更为明显。
[1]张华,李景琳,李传欣,等. 越桔红色素提取工艺的研究.辽宁农业科学,1999(2):8~12
[2]马艳萍.蓝莓的生物学特性、栽培技术与营养保健功能. 中国水土保持.2006(2),47-49
[3]修英涛,常凤英,姜河,等.我国蓝莓(越桔)栽培研究现状及发展措施.辽宁农业科学, 2003(3):21~23
[4] 李亚东.越桔( 蓝莓) 栽培与加工利用.吉林科学技术出版社, 2006.
[5] 刘庆忠,赵红军. 高灌蓝莓的组织培养及快速繁殖.植物生理学通讯, 2002,38(3):253
[6]徐振华,王学勇,李敬川,等•试管苗瓶外生根的研究进展[J]•中国农业通报,2002,18(4):64-86
[7] 唐雪东, 李亚东, 等.不同土壤条件下越橘根系活力和菌根侵染率比较研究.吉林农业大学学报, 2005, 27( 1) : 43- 47.
[8]P. C. Debergh and L. J. Maene .A scheme for commercial propagation of ornamental plants by tissue culture ,Scientia Horticulturae,Volume 14, Issue 4, April 1981, Pages 335-345 |
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